可存活的细胞

低温保存的初代细胞

初代细胞是从人体或动物组织中直接分离出来的细胞,反映了不同身体部位和供体的生物多样性。它们与连续细胞系的区别在于,细胞系通常是通过使健康细胞永生化或选择附着在塑料上并在培养过程中增殖的肿瘤细胞来人工制造的。

初代细胞的特点和用途

由于初代细胞是直接从活体或完整组织(死前或死后)中分离出来的,无需事先进行基因处理,因此它们反映了供体或组织的生物多样性。此外,从健康供体分离出来的细胞具有人体健康细胞的显著特征,例如

  • 有限的增殖和寿命(通常以群体倍增计算)
  • 突变率低
  • 接触抑制
  • 完整的信号通路
  • 内在生物变异性

 

在正常情况下,这些特征对生物体的生命至关重要:在大多数细胞(除精子和卵细胞外的所有细胞,也称为生殖细胞和干细胞)中,细胞分裂与端粒(染色体的末端部分)长度的缩短有关。随着随后的细胞分裂,端粒过短的细胞会失去染色体的稳定性,导致突变率增加、衰老,最终导致细胞死亡。来自附近细胞的几种信号会告知细胞什么时候该停止分裂(这一过程也发生在体外 培养达到细胞汇合后),从而避免细胞死亡。

 

初代健康细胞和肿瘤细胞与细胞系有何不同?

健康细胞

通过恢复端粒酶(参与端粒修复的特殊酶)的功能或破坏导致接触抑制的信号环路来逃避这种衰老机制的单个细胞将继续增殖和积累突变,从而在生物学上与健康细胞有显著差异,并有可能转化为肿瘤细胞。通过人为恢复端粒酶的功能,可以重新创造出相同的条件。由这一过程产生的细胞通常被称为 “细胞系”,因为细胞系是由单个变异细胞或克隆细胞产生的。因此,细胞系并不代表从同一组织中分离出来的不同细胞群,而是同一细胞/克隆的精确拷贝。

肿瘤细胞

原发肿瘤细胞是从原发肿瘤组织中分离出来的细胞,反映了体内原始肿瘤组织的特征。虽然原发肿瘤细胞(肿瘤解离细胞)与健康的原发细胞有相同的生物变异性,但它们通常缺乏有限的增殖/寿命和体内接触抑制,而它们的高突变率导致与健康细胞相比的信号传导变化。尽管在这方面它们与细胞系有明显的相似性,原发肿瘤细胞通常在体外不能长时间增殖或存活,并且需要大量努力来从原发肿瘤细胞中培养出能够贴附在塑料表面的克隆细胞。在这种情况下,贴附的肿瘤细胞形成的细胞系并不代表原发肿瘤在细胞水平上的生物变异性,而只是原始贴附细胞/克隆的复制品。

为什么使用初代细胞?
初代细胞通过从正确的组织和正确的供体中选取合适的细胞,建立生物学上相关的模型,并产生可用于基础研究或药物发现和开发试验的生物学相关数据。建立生物学相关模型可以避免在临床试验后期的失败,因为这些模型能密切模拟人群中的生物变异性。这可以显著节省资金,提高早期研究中的淘汰率,降低整个药物开发过程中的风险。同样,原发肿瘤细胞或肿瘤解离细胞能紧密模拟肿瘤中的生物变异性,但不具备健康初代细胞的功能。因此,必须强调,细胞系和肿瘤细胞系不应用于研究或代表健康初代细胞的行为或功能。
为什么使用细胞系?
细胞系是通过人工永生化原代细胞或选择贴附在塑料上的肿瘤细胞创建的单细胞克隆。它们可以在有限的条件下用于研究基本的细胞行为,但与健康或肿瘤细胞相比,可能会有显著的改变,因为它们的多个信号通路发生了突变,且突变水平显著高于健康细胞。因此,细胞系只能在有限的传代次数内使用,否则会过度偏离原始群体。细胞系突变增加也是不同制造商提供的相似细胞系在常见体外试验中表现不同的原因之一。关于连续细胞系的主要风险之一是细胞类型常常被误识别,以及由于缺乏质量控制而增加的细菌特别是支原体污染的风险。尽管如此,细胞系已证明在商业应用中用于蛋白质生产或在筛选试验中表达蛋白质(例如,在先导化合物发现中)方面是有用的,因此在研究中仍然发挥作用。
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BIOMEX的冷冻保存初代细胞

BIOMEX的初代细胞来源于中欧的自有血浆中心或通过与医院和研究中心的合作。所有细胞都是在伦理规范下获取,并在经过质量控制测试前进行匿名处理。随分析证书提供的供体和细胞特定信息包括人口统计学数据、血清学、HLA I类和II类表型、FCGR3A多态性、吸烟状态、解冻前后血液分析(针对免疫细胞)、药物、过敏和其他疾病。此外,根据细胞类型,细胞会进行无菌测试和细胞激活或功能测试。根据您的需求,还可以进行额外测试、特殊冻存规格或特定细胞类型的专门分离。

欲了解更多信息,请访问我们的服务专页。

  • 外周血单核细胞 (PBMCs)

  • 来自脐带血、动员的白细胞分离液和骨髓的CD34+造血干细胞

  • 来自骨髓的间充质干细胞

  • 脂肪来源的干细胞

  • 牙髓干细胞

冷冻保存的细胞适合您的研究吗
(为什么阅读这篇文章)

如果您已经在研究中使用初代细胞并自己进行细胞分离,您可能从未问过自己这个问题。但为什么商业提供的细胞对您有用呢?

初代细胞的采购、分离和表征需要花费大量的时间和资金。特别是初代细胞和附属材料、表征、细胞扩增和冷冻保存所需的时间和人员成本,对于常规实验中所需的细胞数量可能很高,尤其是在更倾向于使用供体变异性的情况下,而不是每个供体的大批量细胞。因此,许多生物材料可能被浪费或未被使用,人员和材料的综合成本通常远高于从商业制造商处购买冷冻保存细胞的价格,因为商业制造商可以将这些成本分摊给许多用户。

此外,内部细胞分离会迫使您根据分离的物流安排实验,任何失败的分离或生产之间的显著变异都会对实验造成重大影响,并且增加生产时间,可能导致项目延迟,影响资金申请或预算,甚至降低实验室的出版成果。

对一种贴壁细胞类型进行分离的简单计算包括:

1
采购

(从一天到几个月,取决于组织)

2
分离

(1天到1周,取决于细胞类型)

3
扩展和冷冻保存

(约 1 周)

4
解冻和表征

(1 天至 1 个月)

5
无菌测试

(最长 3 周)

考虑您的采购时间表和感兴趣的细胞类型,您会发现在分离细胞上花费的时间往往比生成数据的时间还要多!最后,如果您自己进行细胞分离,您可能需要遵守伦理委员会的伦理许可。根据已同意的知情同意书和收集的数据,您可能没有所有对您的研究有用的数据。

如果您的研究对供体的人口统计信息和临床历史有特别要求,可以考虑商业制造商是否能提供解决方案。

欲了解更多有关我们如何支持您的项目的信息,请联系我们!

我们生命科学领域的专家

通过我们高质量的生物样本和专家服务,释放您研究的潜力。在BIOMEX,我们相信,与客户合作是提高项目成功率、降低成本和缩短开发时间的最佳方式。

超过

PBMC 样品
0
实验室残留样品
300000
特征化的 FFPE 块
2000000